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不要让这些细节影响您的ELISA操作结果

发布时间:2017-08-15   点击次数:619次

不要让这些细节影响您的ELISA操作结果


ELISA试剂盒试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在科研上得到了广泛的运用,但操作中的各个环节对试验的检查效果影响较大,如不留意,有也许致使显色不全、花板等成果。  
下面将操作中各个环节常出现疑问解决办法总结如下:
试剂要挑选质量的检查试剂,严厉依照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
标本搜集与保留:防止运用肉眼可见的溶血标本、高脂标本和混浊标本;2-8℃下,标本可放置24-48小时,长时间保留需放置-20℃下,请防止重复冻融。  
具体请参照:       
1.洗涤液:用前制造,有的试剂盒会标明,配好的4度下通常能够放一个月,假如没有标明,尽量用新鲜的,不要多制造;
2.显色液(有A液和B液的),用前15分钟制造;  
3.规范品:有的试剂盒中规范品是现已制造好的,4度保留,有的是要现制造的,依照说明书操作;  
4.浓缩生物素的二抗和HRP:假如需求制造,试剂盒没注明配好能够保留多久的话,尽量现配现用(用前15分钟制造);原则是试剂盒上没有指出制造物的贮藏方法的话,应该现配现用;不要怕麻烦;还有小瓶的管子开盖前要离心,以免盖子上粘连今后总量不够;
5.加 样:室温温育的试剂,格外是温育时间比较短的试验操作的试剂,加样对数据的影响比较大,格外要留意加样疑问。  
 
欠好的操作因素:不会准确运用加样器; 血清或血浆标本别离欠好即进行加样;手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(格外是室内温度较高时);加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
 

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