更新时间:2017-07-24
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大鼠尿激酶(UK)ELISA试剂盒试剂的加入在国产试剂盒中基本上均是从滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出现重复滴加或加在两孔之间的现象,这样就会在孔内的非包被区出现非特异吸附,从而引起非特异显色。所以,有时候一份标本用相同的elisa试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致。
操作步骤:大鼠尿激酶(UK)ELISA试剂盒
A.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
B.设置标准品孔、样本孔和空白孔,空白孔什么都不加;标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
待测样本孔各加待测样本50μL;
C.随后标准品孔和样本孔中(空白孔不加)加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
D.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
E.所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
F.所有孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
处理及保存方法:大鼠尿激酶(UK)ELISA试剂盒
血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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